Objetivo e Etapas Envolvidas em um Teste de Cariótipo
Se o seu médico recomendou um teste de cariótipo para você ou seu filho, ou após uma amniocentese, o que esse teste implica? Quais as condições que um cariótipo pode diagnosticar, quais são as etapas envolvidas na realização dos testes e quais são suas limitações?
O que é um teste cariotípico?
Um cariótipo é uma fotografia dos cromossomos em uma célula . Os cariótipos podem ser retirados das células do sangue, células da pele fetal (do líquido amniótico ou da placenta) ou células da medula óssea.
Quais condições podem ser diagnosticadas com um teste de cariótipo?
Os cariótipos podem ser usados para rastrear e confirmar anormalidades cromossômicas, como a síndrome de Down, e existem vários tipos diferentes de anormalidades que podem ser detectadas.
Uma delas é trissomia em que há três cópias de um dos cromossomos em vez de dois. Em contraste, as monossomias ocorrem quando apenas uma cópia (em vez de duas) está presente. Além de trissomias e monossomias, há deleções cromossômicas em que falta parte de um cromossomo e translocações cromossômicas, nas quais uma parte de um cromossomo é anexada a outro cromossomo (e vice-versa em translocações balanceadas).
Exemplos de trissomias incluem:
- Síndrome de Down (trissomia 21)
- Síndrome de Edward ( trissomia do cromossomo 18 )
- Síndrome de Patau (trissomia 13)
- Síndrome de Klinefelter (XXY e outras variações) - A síndrome de Klinefelter ocorre em 1 em 500 recém-nascidos do sexo masculino e parece estar aumentando em incidência
- Síndrome do triplo X (XXX)
Um exemplo de uma monossomia inclui:
- Síndrome de Turner (X0) ou monossomia X - Aproximadamente 15% dos abortos são devidos à síndrome de Turner, mas essa trissomia está presente em apenas 1 em 2000 nascidos vivos
Exemplos de deleções cromossômicas incluem:
- Síndrome de Cri-du-Chat (falta do cromossomo 5)
- Síndrome de Williams (falta do cromossomo 7)
Translocações - Existem muitos exemplos de translocações, incluindo a síndrome de Down de translocação. As translocações robertsonianas são bastante comuns, ocorrendo em cerca de 1 em 1000 pessoas.
Mosaicismo é uma condição na qual algumas células do corpo têm uma anormalidade cromossômica, enquanto outras não. Por exemplo, síndrome de Down mosaico ou trissomia em mosaico 9. A trissomia total 9 não é compatível com a vida, mas a trissomia do mosaico 9 pode resultar em um nascimento vivo.
(Um exemplo vale mais que mil palavras. Aprenda sobre as diferenças entre translocação, trissomia e síndrome de Down mosaico .)
Quando um cariótipo é feito?
Existem muitas situações em que um cariótipo pode ser recomendado pelo seu médico. Estes podem incluir:
- Bebês ou crianças que têm condições médicas que sugerem uma anomalia cromossômica que ainda não foi diagnosticada.
- Adultos que apresentam sintomas sugestivos de anormalidade cromossômica (por exemplo, homens com doença de Klinefelter podem não ser diagnosticados até a puberdade ou a idade adulta). Alguns dos distúrbios da trissomia em mosaico também podem não ser diagnosticados.
- Infertilidade - Um cariótipo genético pode ser feito para infertilidade. Como observado acima, algumas anormalidades cromossômicas podem não ser diagnosticadas até a idade adulta. Uma mulher com síndrome de Turner ou um homem com uma das variantes de Klinefelter pode não estar ciente da condição até que esteja lidando com a infertilidade.
- Testagem pré-natal - Em alguns casos, como a síndrome de Down de translocação, a condição pode ser hereditária e os pais podem ser testados se uma criança tiver nascido com uma síndrome de Down. (É importante notar que na maioria das vezes a síndrome de Down não é um distúrbio hereditário, mas sim uma mutação ocasional).
- Natimorto - Um cariótipo é frequentemente feito como parte do teste após um natimorto.
- Abortos recorrentes - Um cariótipo parental de abortos recorrentes pode dar pistas sobre as razões para essas perdas recorrentes devastadoras. Acredita-se que as anormalidades cromossômicas, como a trissomia do cromossomo 16, são a causa de pelo menos 50% dos abortos espontâneos.
- Leucemia - O teste de cariótipo também pode ser feito para ajudar a diagnosticar leucemias, por exemplo, procurando pelo cromossomo Filadélfia encontrado em algumas pessoas com leucemia mielogênica crônica ou leucemia linfocítica aguda.
Etapas Envolvidas em um Teste de Cariótipo
Um teste de cariótipo pode soar como um simples exame de sangue, o que faz com que muitas pessoas se perguntem por que demora tanto para obter os resultados. Este teste é realmente bastante complexo após a coleta. Vamos dar uma olhada nestes passos para que você possa entender o que está acontecendo durante o tempo que você está esperando pelo teste.
1. Coleta de Amostra
O primeiro passo na realização de um cariótipo é coletar uma amostra. Em recém-nascidos, uma amostra de sangue contendo glóbulos vermelhos, glóbulos brancos, soro e outros fluidos é coletada. Um cariótipo será feito nos glóbulos brancos que estão se dividindo ativamente (um estado conhecido como mitose). Durante a gravidez, a amostra pode ser um líquido amniótico coletado durante uma amniocentese ou um pedaço de placenta coletado durante um teste de amostragem de vilosidades coriônicas (CVS). O líquido amniótico contém células da pele fetal que são usadas para gerar um cariótipo.
2. Transporte para o Laboratório
Os cariótipos são realizados em um laboratório específico chamado laboratório de citogenética - um laboratório que estuda os cromossomos. Nem todos os hospitais têm laboratórios de citogenética. Se o seu hospital ou instituição médica não tiver seu próprio laboratório de citogenética, a amostra de teste será enviada para um laboratório especializado em análise cariotípica. A amostra de teste é analisada por tecnólogos citogenéticos especialmente treinados, Ph.D. citogeneticistas, ou geneticistas médicos.
3. Separando as Células
Para analisar os cromossomos, a amostra deve conter células que estão se dividindo ativamente. No sangue, os glóbulos brancos se dividem ativamente. A maioria das células fetais também se divide ativamente. Quando a amostra atinge o laboratório de citogenética, as células não divididas são separadas das células em divisão usando produtos químicos especiais.
4. Cultivando Células
A fim de ter células suficientes para analisar, as células em divisão são cultivadas em meios especiais ou uma cultura de células. Esta mídia contém produtos químicos e hormônios que permitem que as células se dividam e se multipliquem. Esse processo de cultura pode levar de três a quatro dias para as células do sangue e até uma semana para as células fetais.
5. Sincronizando Células
Os cromossomos são uma longa cadeia de DNA humano. Para ver os cromossomos sob um microscópio, os cromossomos precisam estar em sua forma mais compacta em uma fase de divisão celular (mitose) conhecida como metáfase. A fim de obter todas as células para este estágio específico da divisão celular, as células são tratadas com uma substância química que interrompe a divisão celular no ponto em que os cromossomos são os mais compactos.
6. Liberando os cromossomos de suas células
Para ver esses cromossomos compactos sob um microscópio, os cromossomos precisam estar fora dos glóbulos brancos. Isso é feito tratando os glóbulos brancos com uma solução especial que faz com que eles explodam. Isso é feito enquanto as células estão em um slide microscópico. Os detritos remanescentes dos glóbulos brancos são lavados, deixando os cromossomos presos ao slide.
7. Coloração dos Cromossomos
Os cromossomos são naturalmente incolores. Para distinguir um cromossomo de outro, um corante especial chamado corante Giemsa é aplicado ao slide. O corante Giemsa mancha regiões de cromossomos que são ricos nas bases adenina (A) e timina (T). Quando manchados, os cromossomos se parecem com cordas com bandas claras e escuras. Cada cromossomo possui um padrão específico de bandas claras e escuras que permitem ao citogênico distinguir um cromossomo de outro. Cada faixa escura ou clara engloba centenas de genes diferentes.
8. Análise
Uma vez que os cromossomos estão corados, o slide é colocado sob o microscópio para análise. Uma foto é então tirada dos cromossomos. Ao final da análise, o número total de cromossomos será determinado e os cromossomos organizados por tamanho.
9. Contando Cromossomos
O primeiro passo da análise é contar os cromossomos. A maioria dos humanos tem 46 cromossomos. Pessoas com síndrome de Down têm 47 cromossomos. Também é possível que as pessoas tenham cromossomos ausentes, mais de um cromossomo extra ou uma parte de um cromossomo que esteja faltando ou seja duplicada. Ao olhar apenas o número de cromossomos, é possível diagnosticar diferentes condições, incluindo a síndrome de Down.
10. Classificando Cromossomos
Depois de determinar o número de cromossomos, o citogeneticista começará a classificar os cromossomos. Para classificar os cromossomos, um citogeneticista irá comparar o comprimento dos cromossomos, a localização dos centrômeros (as áreas onde as duas cromátides estão unidas) e a localização e tamanhos das bandas G. Os pares de cromossomos são numerados de maior (número 1) a menor (número 22). Existem 22 pares de cromossomos, chamados autossomos, que correspondem exatamente. Há também os cromossomos sexuais, as fêmeas têm dois cromossomos X, enquanto os machos têm um X e um Y.
11. Olhando para a estrutura
Além de observar o número total de cromossomos e os cromossomos sexuais, o citogeneticista também examinará a estrutura dos cromossomos específicos para garantir que não haja material ausente ou adicional, além de anormalidades estruturais, como translocações. Uma translocação ocorre quando uma parte de um cromossomo é anexada a outro cromossomo. Em alguns casos, dois pedaços de cromossomos são trocados (uma translocação equilibrada) e outras vezes uma peça extra é adicionada ou ausente de um cromossomo sozinho.
12. O Resultado Final
No final, o cariótipo final mostra o número total de cromossomos, o sexo e quaisquer anormalidades estruturais com cromossomos individuais. Uma imagem digital dos cromossomos é gerada com todos os cromossomos organizados por número.
Limites do teste de cariótipo
É importante notar que, embora o teste de cariótipo possa fornecer muitas informações sobre os cromossomos, este teste não pode dizer se mutações genéticas específicas, como aquelas que causam a fibrose cística , estão presentes. Seu conselheiro genético pode ajudá-lo a entender o que os testes cariotípicos podem dizer e o que eles não podem. Mais estudos são necessários para avaliar o possível papel de mutações genéticas em doenças ou abortos espontâneos.
Também é importante notar que, às vezes, o teste cariotípico pode não ser capaz de detectar algumas anormalidades cromossômicas, como quando o mosaicismo placentário está presente.
O futuro
No momento atual, o teste de cariótipo no cenário pré-natal é bastante invasivo, exigindo amniocentese ou amostragem de vilosidades coriônicas. Estudos estão em andamento avaliando o DNA livre de células em uma amostra de sangue da mãe como uma alternativa muito menos invasiva para o diagnóstico pré-natal de anormalidades genéticas em um feto.
Linha de fundo na espera de seus resultados de cariótipo
Enquanto aguarda os resultados do seu cariótipo, você pode estar se sentindo muito ansioso, e a semana ou duas necessárias para obter resultados pode parecer uma eternidade. Aproveite esse tempo para se apoiar em seus amigos e familiares. Aprender sobre algumas das condições associadas a cromossomos anormais também pode ser útil. Embora muitas das condições diagnosticadas com um cariótipo possam ser devastadoras, há muitas pessoas vivendo com essas condições que têm uma excelente qualidade de vida.
> Fontes
- Kumar, Vinay, Abul K. Abbas e Jon C. Aster. Robbins e Cotran base patológica da doença. Filadélfia: Elsevier-Saunders, 2015. Impressão.
- > Norton, M. e B. Rink. Alterando Indicações para Testes Invasivos em uma Era de Triagem Aprimorada. Seminários em Perinatologia . 2016. 40 (1): 56-66.
- > Shah, M., Cinnioglu, C., Maisenbacher, M., Comstock, I., Kort, J. e R. Lathi. Comparação de Citogenética e Cariotipagem Molecular para Testes de Cromossomo de Amostras de Aborto. Fertilidade e Esterilidade . 2017. 107 (4): 1028-1033.