Hibridização In Situ por Fluorescência
A hibridização in situ fluorescente (FISH) é uma das várias técnicas usadas para pesquisar o DNA de suas células, procurando a presença ou ausência de genes específicos ou porções de genes.
Muitos tipos diferentes de câncer estão associados a anormalidades genéticas conhecidas. E por genética, não estamos falando apenas de hereditariedade. Ao longo da vida, as células podem cometer erros quando se dividem e crescem.
Mutações no DNA que estão associadas ao câncer podem se acumular nessas células.
Como funciona o peixe?
FISH é uma técnica que utiliza sondas fluorescentes para detectar genes específicos ou partes de genes (sequências de DNA). Pessoal de laboratório do centro médico e oncologistas usam FISH para ajudar a avaliar pacientes que podem ter câncer, e às vezes para monitorar um paciente que já tenha sido diagnosticado com câncer e tratado.
FISH pode ser feito usando vários tipos de amostras de acordo com a localização e o tipo de câncer suspeito: Células tumorais obtidas de sangue periférico, de uma biópsia de medula óssea ou de uma biópsia de linfonodo, e tecido fixado em parafina fixado em formalina (isto se refere a uma amostra de tecido que é processada no laboratório e incorporada em um tipo de cera, tornando-a mais rígida, para que possa ser cortada em seções finas e montada para visualização no microscópio).
O que significam as letras?
O “H” em FISH refere-se à hibridização.
Na hibridização molecular, uma sequência de DNA ou RNA marcada é usada como uma sonda - visualize um tijolo vermelho Lego, se quiser. A sonda é usada para encontrar uma réplica do tijolo de Lego, ou seqüência de DNA, em uma amostra biológica.
O DNA do seu espécime é como pilhas de tijolos de Lego, e a maioria dos tijolos nessas pilhas não combinam com a nossa sonda vermelha.
E todos os seus tijolos estão organizados em 23 pares de pilhas de tijolos - cada pilha é um dos seus cromossomos homólogos pareados, mais ou menos. Ao contrário dos tijolos de Lego, a nossa sonda Lego vermelha é como um íman forte e encontra o seu fósforo sem ter que separar as pilhas.
O "F" refere-se a fluorescência. Nossa sonda vermelha pode se perder nas pilhas de tijolos, por isso é rotulada com tinta fluorescente colorida para que ela brilhe. Quando encontra sua correspondência entre as 23 pilhas emparelhadas, uma tag fluorescente revela sua localização. Então, agora você pode ver como os pesquisadores e os médicos podem usar o FISH para ajudar a identificar onde (qual pilha ou qual cromossomo) um determinado gene está localizado para um determinado indivíduo.
O "eu" e o "S" significam in situ . Isso se refere ao fato de que nosso tijolo vermelho da Lego está procurando sua correspondência dentro da amostra que você deu .
E quanto aos cânceres sanguíneos específicos?
FISH e outros procedimentos de hibridização in situ são usados para diagnosticar uma variedade de anormalidades cromossômicas - alterações no material genético, alterações nos cromossomos, incluindo os seguintes:
Supressão - parte de um cromossomo desapareceu
Translocação - parte de um cromossomo se quebra e gruda em outro cromossomo
Inversão - parte de um cromossomo se interrompe e é reinserida novamente, mas em ordem inversa
Duplicação - parte de um cromossomo está presente em muitas cópias dentro da célula
Cada tipo de câncer pode ter seu próprio conjunto de alterações cromossômicas e sondas relevantes. FISH não só ajuda a identificar as mudanças genéticas iniciais em um processo de doença como o câncer, mas também pode ser usado para monitorar a resposta à terapia e remissão da doença.
As alterações genéticas detectadas pelo FISH, por vezes, oferecem informações adicionais sobre como o câncer de um indivíduo é susceptível de se comportar, com base no que foi observado no passado em pessoas com o mesmo tipo de câncer e alterações genéticas semelhantes. Às vezes, o FISH é usado depois que o diagnóstico já foi feito, para coletar informações adicionais que podem ajudar a prever o resultado do paciente ou o melhor tratamento.
FISH pode identificar anormalidades cromossômicas em leucemias , inclusive na leucemia linfocítica crônica (LLC). Para a leucemia linfocítica crônica / linfoma linfocítico pequeno, o FISH permite que os pacientes descubram sua categoria prognóstica: boa, intermediária ou ruim. Na leucemia linfoblástica aguda (LLA), a genética das células leucêmicas pode informá-lo sobre o nível de risco do câncer e ajudar a orientar as decisões terapêuticas.
Os painéis FISH também estão disponíveis para linfoma, mieloma múltiplo, distúrbios proliferativos das células plasmáticas e síndrome mielodisplásica. No caso do linfoma de células do manto, por exemplo, há uma translocação que o FISH pode detectar, denominada GH / CCND1t (11; 14), freqüentemente associada a esse linfoma.
Porquê FISH?
Uma vantagem do FISH é que ele não precisa ser executado em células que estão se dividindo ativamente. O teste citogenético geralmente leva cerca de três semanas, porque as células cancerosas devem crescer em laboratório por cerca de duas semanas antes de poderem ser testadas. Em contraste, os resultados FISH estão geralmente disponíveis no laboratório dentro de alguns dias.
> Fontes:
> CIT Citogenética de Teste de Câncer.
> Hibridização In Situ por Fluorescência (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Hibridização In Situ por Fluorescência (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, e outros. Orientação para Fluorescência do Teste de Hibridização In Situ em Distúrbios Hematológicos. O Journal of Molecular Diagnostics: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.